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基因編輯技術(shù)研究新應(yīng)用,Ausbian干細(xì)胞專用培養(yǎng)基助力科研

更新時(shí)間:2023-12-02  |  點(diǎn)擊率:716

干細(xì)胞相關(guān)研究需要建立符合實(shí)驗(yàn)?zāi)康牡呐囵B(yǎng)體系。一種通用型培養(yǎng)體系,可以大大提高干細(xì)胞培養(yǎng)效率。Ausbian干細(xì)胞專用培養(yǎng)基,能夠維持干細(xì)胞干性,盡可能延緩干細(xì)胞的分化,使培養(yǎng)人員輕松實(shí)現(xiàn)干細(xì)胞培養(yǎng)自由。

 

通過破壞抑制性調(diào)節(jié)結(jié)構(gòu)域,重新激活沉默的γ-珠蛋白表達(dá),為治療β-血紅蛋白病提供了一種治療策略。

 

近日,科研人員使用變形式堿基編輯器(transformer base editor,tBE),一種在2023年開發(fā)的胞嘧啶堿基編輯器,在未檢測(cè)到脫靶突變的情況下,來破壞造血干細(xì)胞中的轉(zhuǎn)錄因子結(jié)合基序。

 

相關(guān)研究發(fā)表在《Nature Cell Biology》上,文章標(biāo)題為:“Eliminating base-editor-induced genome-wide and transcriptome-wide off-target mutations"。

 

該研究構(gòu)建了一種名為變形式堿基編輯器(transformer base editors,簡(jiǎn)稱tBE)的高精準(zhǔn)堿基編輯系統(tǒng)。該系統(tǒng)解決了堿基編輯器從科研轉(zhuǎn)化為臨床應(yīng)用的兩個(gè)關(guān)鍵障礙——安全性和效率問題,tBE在小鼠體內(nèi)實(shí)現(xiàn)了靶位點(diǎn)的高效編輯,且沒有可檢測(cè)到的全基因組和全轉(zhuǎn)錄組的脫靶效應(yīng)。

 

通過對(duì)六個(gè)基序的功能篩選,科研人員發(fā)現(xiàn)直接破壞HBG1/2啟動(dòng)子中的bcl11a結(jié)合基序可觸發(fā)最高的γ-珠蛋白表達(dá)。通過與其他使用Cas9核酸酶或傳統(tǒng)BEs (ABE8ehA3A-BE3)的臨床和臨床前策略進(jìn)行對(duì)比,研究人員發(fā)現(xiàn)be介導(dǎo)的HBG1/2啟動(dòng)子上bcl11a結(jié)合基元的破壞,在健康和β-地中海貧血患者造血干細(xì)胞/祖細(xì)胞中,觸發(fā)了最高的胎兒血紅蛋白,同時(shí)沒有檢測(cè)到DNARNA脫靶突變。

 

在造血干細(xì)胞的再生過程中,be持續(xù)進(jìn)行治療性編輯,這表明在HBG1/2啟動(dòng)子中,be介導(dǎo)的編輯是治療β-血紅蛋白病的一種安全有效的策略。


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