細(xì)胞污染支原體，是令細(xì)胞培養(yǎng)相關(guān)從業(yè)者十分頭疼的問(wèn)題。細(xì)胞感染了支原體又不愿丟棄怎么辦？本系列內(nèi)容分情況為大家解答。

01

普通細(xì)胞支原體祛除

適用范圍

對(duì)于費(fèi)力擴(kuò)增的細(xì)胞（如已轉(zhuǎn)染，或經(jīng)過(guò)體外刺激），如果細(xì)胞中發(fā)現(xiàn)有支原體污染，但此細(xì)胞又不愿丟棄，希望繼續(xù)培養(yǎng)，推薦使用MB公司生產(chǎn)的復(fù)合抗生素Zell Shield®。

02

Zell Shield®特點(diǎn)

·特點(diǎn)

• 高效廣譜：Zell Shield®通過(guò)阻止支原體、真菌、霉菌、致命病菌增殖過(guò)程中DNA及蛋白的合成，有效抑制上述微生物的增殖。

• 安全：無(wú)細(xì)胞毒性，采用復(fù)合支原體敏感抗生素，對(duì)大多數(shù)細(xì)胞株無(wú)毒。

• 活性穩(wěn)定：在細(xì)胞培養(yǎng)期間，Zell Shield®始終保持穩(wěn)定的活性。

• 使用方便：Zell Shield®為無(wú)菌溶液，可直接加入培養(yǎng)基使用。

03

Zell Shield®使用方法

使用方法

（1）在每次使用Zell Shield®之前，細(xì)胞傳代時(shí)，先使用廠家推薦的“懸浮沖洗法”處理好細(xì)胞，再使用加了Zell Shield®的培養(yǎng)基養(yǎng)細(xì)胞，能達(dá)到*佳的祛除支原體的效果。

（2）Zell Shield®常規(guī)為-18℃保存，建議使用前，先融化分裝，仍舊-18℃避光保存，使用時(shí)按需融化配置。避免反復(fù)凍融。

（3）Zell Shield®按1:100濃度可直接加入培養(yǎng)基。例如：500ml培養(yǎng)基中添加5ml Zell Shield®，50mL/瓶的Zell Shield®可供5L培養(yǎng)基使用。

什么是懸浮沖洗法

據(jù)研究表明，約98％的支原體存在于細(xì)胞表面和細(xì)胞間隙。細(xì)胞傳代時(shí)，用干凈的PBS反復(fù)懸浮沖洗，就能把70%以上的支原體沖下來(lái)。

支原體直徑在180~350nm之間，遠(yuǎn)遠(yuǎn)小于細(xì)胞直徑。通過(guò)低速離心，很容易將細(xì)胞和支原體分離，棄上清即可祛除大部分支原體。

簡(jiǎn)要步驟

消化細(xì)胞

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離心

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棄上清

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PBS清洗細(xì)胞

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低速離心棄上清

重復(fù)清洗3次

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加入含有Zell Shield®的