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關(guān)于牛血清的一些常識

更新時間:2021-12-20  |  點擊率:746

科研實驗中,細(xì)胞的體外培養(yǎng)一直是一個重要環(huán)節(jié)。細(xì)胞要養(yǎng)好,就要用好血清,如Ausbian®特級胎牛血清,它適合各種細(xì)胞培養(yǎng),尤其適合難養(yǎng)細(xì)胞,如:干細(xì)胞、肝細(xì)胞,神經(jīng)細(xì)胞,原代培養(yǎng)、細(xì)胞融合、轉(zhuǎn)染細(xì)胞等。

Ausbian®特級胎牛血清所有血清出廠前,均經(jīng)過嚴(yán)格質(zhì)控,每個批次附有詳細(xì)完整的《檢測報告》,包括:品名,貨號,批號,血源地,生產(chǎn)日期,保質(zhì)期,pH值、滲透壓、血紅蛋白、總蛋白、球蛋白、IgG、內(nèi)毒素、無菌檢查(細(xì)菌、真菌、支原體)、病毒檢查(如BVD、牛腺病毒、細(xì)胞病變效應(yīng)等)、促細(xì)胞生長能力、細(xì)胞毒性、BVD-1/2抗體檢查等。

防止發(fā)病免疫血清多用馬、牛血液制備,馬、牛血清對其它動物來說,也具有抗原性,有引起血清病的可能,因此,使用免疫血清要注意防止引起血清病,預(yù)防的主要措施是使用提純的制品,不用不合格的產(chǎn)品;另外,不要有急功近利的想法,要按照要求劑量使用,一次用量不可過大

關(guān)于牛血清的一些常識

1. 血清的保存:在-15℃以下血清的有效期為5年,4℃可保存數(shù)周,不宜室溫保存,不宜反復(fù)凍融。配制成*培養(yǎng)基后應(yīng)在四周內(nèi)用完,一瓶血清如無法一次用完應(yīng)無菌分裝成恰當(dāng)數(shù)量并冷凍保存。

2、 血清中的絮狀沉淀物:血清是多種蛋白質(zhì)的混合物,在凍融過程中會出現(xiàn)絮狀沉淀物,主要原因是由于血清中脂蛋白和纖維蛋白變性所造成。但并不影響血清本身的質(zhì)量和使用。如需去除可先400g離心取上清液配制成*培養(yǎng)基再過濾即可使用。

3、 血清的解凍:合理的解凍方式可以更好的保護(hù)血清質(zhì)量并可以在zui大程度上減少絮狀沉淀物的產(chǎn)生。血清從低溫冰箱中取出后,經(jīng)4℃冰箱、室溫、37℃水浴逐步規(guī)則搖晃均勻融解,直至*融解后再使用。

4、 血清的熱滅活:將血清嚴(yán)格56℃水浴均勻加溫30分鐘可以滅活血清中的補體系統(tǒng)。是不是所有用途的血清都需要熱滅活呢?對大多數(shù)細(xì)胞來說是不需要的。激活的補體能參與溶解細(xì)胞,刺激光滑肌收縮,細(xì)胞和血小板釋放組胺,激活淋巴細(xì)胞和巨噬細(xì)胞。因此在免疫學(xué)研究,培養(yǎng)ES細(xì)胞,昆蟲細(xì)胞和平滑肌肉細(xì)胞時,建議使用熱滅活血清,在正常情況下加熱處理對血清的促細(xì)胞生長效應(yīng)無明顯促進(jìn)作用,甚至?xí)驗榧訜崽幚碛绊懷宓馁|(zhì)量。

5、 血清中的“小黑點"現(xiàn)象:血清在經(jīng)過一段時間的低溫凍存再融解后,在正常情況下會出現(xiàn)絮狀蛋白沉淀。但往往有用戶反應(yīng)血清中有“小黑點"現(xiàn)象,認(rèn)為是微生物污染。實驗發(fā)現(xiàn)血清在37℃環(huán)境放置時間過長或經(jīng)過加熱滅活處理,血清中的沉淀物往往會呈增多趨勢,這些沉淀物在倒置顯微鏡下觀察,像是“小黑點",讓使用者誤以為是血清遭受微生物污染并在分裂增殖。因此如無必要,*可以不進(jìn)行熱滅活處理并保證血清的低溫保存。

實驗證明使用血清時注意以下幾點事項不但可以保證血清質(zhì)量并能給使用者帶來方便:

◎ 在-15℃以下低溫保存。

◎ 一瓶血清一次無法用完的應(yīng)分裝凍存,分次用完。

◎ 按-15℃以下至4℃至室溫至37℃逐步均勻解凍使用。

◎ 若非必要,無須進(jìn)行熱滅活。若必須做血清熱滅活的,須嚴(yán)格控制在56℃水浴30分鐘均勻加熱滅活。



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