單增李斯特氏菌顯色培養(yǎng)基

（HiCromeTML.mono Rapid Differential Agar Base）

應(yīng)用

用于快速鑒定和鑒別單核細(xì)胞增生李斯特菌，并與其他李斯特菌物種相區(qū)分。 

原理　　　　 
主要基于“β-葡糖苷酶”、“鼠李糖發(fā)酵”和“PIPLC活性”（磷脂酰肌醇特異性磷脂酶C）。

李斯特氏菌*的“β-葡糖苷酶”水解顯色底物，菌落呈藍(lán)色。其他菌無β-葡糖苷酶，菌落呈白色。

“鼠李糖發(fā)酵”和“PIPLC活性”區(qū)分李斯特內(nèi)部菌種。單增李斯特氏菌鼠李糖陽性，菌落呈藍(lán)綠色；同時(shí)PIPLC陽性，有不透明光環(huán)。綿羊李斯特菌（伊氏李斯特氏菌）有PIPLC活性而沒有黃色背景（鼠李糖陰性）（2,3）。英諾克李斯特菌PIPLC陰性，沒有不透明的光環(huán)。（4,5）。

培養(yǎng)基中的特殊蛋白胨、胰蛋白胨和大豆蛋白胨提供含氮物質(zhì)、維生素B復(fù)合物和其他必需的營養(yǎng)成分。鼠李糖為發(fā)酵糖，酚紅為指示劑。氯化鈉維持滲透壓平衡。氯化鋰和添加劑1（FD181）抑制大多數(shù)革蘭氏陽性菌、革蘭氏陰性菌、酵母菌和霉菌生長。磷脂酶C水解添加劑2（FD214），通過在單增李斯特氏菌菌落周圍產(chǎn)生不透明的光環(huán)，用以證明PIPLC活性的存在。

背景

單核細(xì)胞增生李斯特氏菌是一種革蘭氏陽性食源性人類病原體，使孕婦嚴(yán)重感染并終可能導(dǎo)致流產(chǎn)、死胎、新生兒李斯特氏菌病和腦膜炎或成人和青少年原發(fā)性菌血癥。綿羊李斯特菌對(duì)人類的致病性不確定(1)。由于單核細(xì)胞增生李斯特氏菌和英諾克李斯特氏菌具有相似的生化特性，傳統(tǒng)培養(yǎng)基（PALCAM）不能區(qū)分。

培養(yǎng)基組分

配制

35.14g干粉溶 470ml蒸餾水。加熱使全溶。15磅（121℃）滅菌15分鐘。冷卻至45-50℃。無菌加入添加劑1，2（FD214和FD181）各1管?；靹虿⒌谷霟o菌培養(yǎng)皿中。

警告：氯化鋰是有害的。避免身體接觸和吸入蒸氣。一旦與皮膚接觸，應(yīng)用大量水沖洗。

質(zhì)量控制

外觀：淡黃~粉紅粉末。

成膠性：牢固，與1.5％瓊脂凝膠相當(dāng)。

成品顏色和透明度：紅色的不透明凝膠。

pH值：7.20-7.60

培養(yǎng)反應(yīng)　　　　　                                                                              

加入添加劑后35-37℃孵育24-48小時(shí)。

參考文獻(xiàn)

1.Schlech WF, Lavigne PM, Bortolussi RA, et al.(January 1983). "Epidemic listeriosis-evidence for transmission by food". N.Engl. J.Med. 308(4): 203–6. doi:10.1056.

2.Notermans S.H. and Dufrenne J., (1991), Applied and Environmental Microbiology, 57(09): 2666-70.

3.Mengaud J., Braun-Breton C. and Cossart P., (1991), Molecular Microbiology, 5(2): 367-372.P

4.Ottaviani F., Ottaviani M., and Agosti M. (1997 a), Industrie Alimentari 36, 1-3.

5.Ottaviani F., Ottaviani M., and Agosti M. (1997 b), Quimper Froid Symposium Proceedings p. 6, A.D.R.I.A.Quimper,France, 16-18 June 1997.